1樓：匿名使用者
bradford法測定蛋白質濃度（一）實驗原理雙縮脲法（biuret法）和folin—酚試劑法（lowry法）的明顯缺點和許多限制，促使科學家們去尋找更好的蛋白質溶液測定的方法。1976年由bradford建立的考馬斯亮蘭法（bradford法），是根據蛋白質與染料相結合的原理設計的。這種蛋白質測定法具有超過其他幾種方法的突出優點，因而正在得到廣泛的應用。
這一方法是目扒猛納前靈敏度最高的蛋白質測定法。考馬斯亮蘭g-250染料，在酸性溶液中與蛋白質結合，使染料的最大吸收峰的位置（max），由465nm變為595nm，溶液的顏色也由棕黑色變為蘭色。在595nm下測定的吸光度值a595，與蛋白質濃度成正比。
bradford法的突出優點是：（1）靈敏度高，據估計比lowry法約高四倍，其最低蛋白質檢測量可達1g。這是因為蛋白質與染料結合後產生的顏色變化很大，蛋白質－染料複合物有更高的消光係數，因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比lowry法要大的多。
2）測定快速、簡便，只春沒需加一種試劑。完成乙個樣品的測定，只需要5分鐘左右。由於染料與蛋白質結合的過程，大約只要2分鐘即可完成，其顏色可以在1小時內保持穩定，且在5分鐘至20分鐘之間，顏色的穩定性最好。
因而完全不用像lowry法那樣費時和嚴格地控制知李時間。（3）干擾物質少。如干擾lowry法的k+、na+、mg2+離子、tris緩衝液、糖和蔗糖、甘油、巰基乙醇、edta等均不干擾此測定法。
2樓：匿名使用者
蛋白質濃度測定棗物 雙縮脲法原理。
將尿素加熱，兩分子尿素放出一分子氨而形成雙縮脲（nh2-co-nh-co-nh2）。
雙縮脲在鹼性溶液中與cu2+結合生成紫色絡合物，滾攜這一呈色反應稱為雙縮脲反應。蛋白質分子中的肽鍵類似雙縮脲結構，故亦能呈雙縮脲反應。
生物幫上面有這方大巖伏面的詳細介紹，pcr儀。
雙縮脲法測定蛋白質含量
3樓：司澤南聿
雙縮脲法測定蛋白質含量實驗方法如下：
實驗目的：1.掌握分光光度計的使用方法。
2.掌握標準管法測物質含量的方法。
3.掌握雙縮脲法測定蛋白質含量的方法。
一、原理：雙縮脲是由兩分子尿素縮合而成的化合物，在鹼性溶液中與硫酸銅反應生成紫紅色絡合物，此反應即為雙縮脲反應。含有兩個或兩個以上肽鍵的化合物都具有雙縮脲反應。 蛋白質含有多個肽鍵，在鹼性溶液中能與cu 2+ 絡合成紫紅色化合物。
其顏色深淺與蛋白質的濃度 成正比，可以用比色法進行測定。雙縮脲法最常用於需要快速但並不需要十分精確的測定。
二、 試劑 和器材。
試劑 :1) 標準蛋白溶液（5mg/ml）:準確稱取已定氮的酪蛋白(乾酪素或牛血清白蛋白)用0．05mol/l氫氧化鈉溶液配製，冰箱存放備用。
2) 雙縮脲試劑：溶解硫酸銅（cuso 4 ·5h 2 o）和酒石酸鉀鈉（nakc 4 h 4 o 6 ·4h 2 o）於500ml蒸餾水中，在攪拌下加入300ml10％氫氧化鈉溶液，用水稀釋到1000ml，貯存於內壁塗以石蠟的瓶內。此試劑可長期儲存。
3) 樣品血清：動物血清用水稀釋10倍，置於冰箱儲存備用。標準曲線法所用的血清需20倍稀釋。
器材：分析天平、分光光度計、 恆溫水浴箱、 試管 、 吸量管等。
三、操作方法：
1、取三支 試管 按下表操作。
2、搖勻，37℃ 水浴 20min後用 分光光度計 於540nm波長處比色，以空白管調零點，測得各管吸光度。
3、計算：血清 總蛋白 質(g／100ml）＝a 測 /a 標 ×
雙縮脲試劑檢測蛋白質原理是什麼?
4樓：乾萊資訊諮詢
蛋白質分子中含有很多和雙縮脲結構相似的肽鍵。
因此也能起雙縮脲反應，形成紅紫色絡合歷培物。
雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲，由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此也能與銅離子。
在鹼性溶液中發生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時，試液中的銅與多肽配位，絡合物呈紫色。可通過比色法分析濃度。
雙縮脲法測定蛋白質的優缺點：
優點：雙縮脲法測定蛋白質的測定範圍是1~10mg蛋白質，操作簡單、快捷。既適合手工操作，又適合自動化分析，重複性好、線性關係好，雙縮脲試劑可以長期儲存。
缺點：靈敏度差，測定範圍窄，樣品需要量大，不同的蛋白質產生顏色的深淺相近，因此它常用於需要快速，但並不需要十分精確的蛋白質悄衫測定。
干擾測定的物質包括有：在性質上是氨基酸。
或肽的緩衝液。
如tris緩衝液，因為它們產生陽性呈色反應，銅離子也容易被還原，有時出現紅色沉澱。
雙縮脲法測定蛋白質含量計算
5樓：教育學堂
雙縮脲法測定蛋白質含量計算如下：
學習雙縮脲法測定蛋白質的原理和方法。
實驗原理：具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆有雙縮脲反應。在鹼性溶液中雙縮脲與銅離子結合形成複雜的紫紅色複合物。
而蛋白質及多肽的肽鍵與雙縮脲的結構類似，也能與銅離子形成紫紅色配位化合物，其最大光吸收在540nm處。
其顏色深淺與蛋白質濃度成正比，而與蛋白質的相對分子質量及氨基酸的組成無關，該法測定蛋白質的濃度範圍適用於1~10mg/ml，雙縮脲法常用於蛋白質的快速測定。
實驗操作：取雙縮脲試劑、10mg/ml的標準蛋白溶液和待測蛋白溶液（稀釋10倍的人血清），按下表配製6支溶液：
紫外吸收測定法目的要求：瞭解紫外吸收法測定蛋白質含量的原理。
掌握紫外分光光度計的使用方法。
實驗原理：蛋白質分子中所含酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，使蛋白質在280nm 波長處有最大吸收值。在一定濃度範圍內，蛋白質溶液的光吸收值（a280）與其含量成正比關係，可用作定量測定。
紫外線吸收法測定蛋白質含量的優點是迅速、簡便，不消耗樣品，低濃度鹽類不干擾測定。因此。廣泛應用在柱層析分離中蛋白質洗脫情況的檢測。
此法的缺點是∶（1）對於測定那些與標準蛋白質中酪氨酸和色氨酸含量差異較大的蛋白質，有一定的誤差。（2）若樣品中核酸等吸收紫外線的物質，會出現較大的干擾。不同的蛋白質和核酸的紫外線吸收是不同的，即使經過校正，測定結果也還存在一定的誤差。
氫氧化鈉的濃度偏低對測定蛋白質有什麼影響
氫氧化鈉在還原糖的檢驗實驗中的作用 氫氧化鈉用於生成氫氧化銅 因為反應條件一定要是新制的 通過與醛基反應鑑定還原糖。還原糖的檢驗實驗 1 原理樣品經除去蛋白質後，在加熱條件下，直接滴定已標定過的費林氏液，費林氏液被還原析出氧化亞銅後，過量的還原糖立即將次甲基藍還原，使藍色褪色。根據樣品消耗體積，計算...
尿檢蛋白質，尿檢蛋白質
1 的蛋白，最近清淡飲食，少吃肉類，豆類。多休息。不要熬夜。一週後複查，還是1 的話，就需要 排除腎炎早期了 多喝水，吃點清熱的食物，上火，喝水少，小便容易黃 假如確診腎炎的話，不太建議在上海工作的，壓力太大。飲食水質也不太好。正常尿液裡不含或只含微量蛋白質，檢查結果呈陰性 當尿液裡的蛋白質含量上升...
蛋白質有什麼作用，蛋白質的作用
老趙給您聊聊蛋白質的分類 對增肌減脂的作用 需求量及計算方法。蛋白質分為兩種 一.動物蛋白 是蛋白質的主要 如肉類及禽蛋類等，這些食物在提供蛋白質的同時也會使我們食入飽和脂肪和膽固醇等對身體不利的成分。因此選用瘦肉 魚 去皮雞肉和蛋清最佳，它們稱為 優質蛋白 二.植物蛋白 是蛋白質的另一 主要存在於...