可以用紫外分光光度法對氨基酸,蛋白質進行定量分析嗎

2025-05-14 10:31:00 字數 2517 閱讀 5392

1樓:兆蘆雪官娜

可以的虛頌弊。

紫外差族分光光度法也是一種重要的檢測蛋白質濃度的方法。

蛋白質中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵,因此,蛋白質具有吸收紫外光的性質,其最大吸櫻亮收峰位於280

nm附近(不同的蛋白質吸收波長略有差別)。

2樓:吾澎湃類洮

可以,而且實際上也是這麼幹的。

不過用紫外分光光度法來分析有兩種,一種是直接把蛋白質或氨基酸溶液在猛悶仔od280下看峰,高階一點的如nanodrop這種機器就可以直接給出蛋白濃度,但這種枝汪方法極易受到抽提蛋白時去汙劑的影響而出現嚴重偏差,所以如果是在緩衝液中的純蛋白是可罩鉛以這麼檢測定量的,比如買來的抗體就會提供od280的數值來計算濃度。

實際中常用的幾種蛋白定量是將蛋白或氨基酸的溶液與某些化學物質反應(如bca法、broadford法等)後在上紫外分光光度計測量od值,用標準蛋白如bsa做乙個標準曲線,再將未知蛋白測得的od與標曲進行比較測得準確的濃度,在一定的濃度範圍內,這些方法的準確性很高。

氨基酸紫外吸收特性在氨基酸、蛋白質濃度測定中的應用。

3樓:考試資料網

派含衡答案】:含有共軛雙鍵的氨基酸(tyr、phe、trp)在近紫外區280m有吸收峰。根據lambert-beer定律,如果測出光吸收度a,可求出濃度c。

同理,由於蛋白質中含有這類氨基酸,可通過測定280nm處光吸收度來計算其濃度(紫外塵做分光光度法測定蛋白質濃度的理論基礎)。但是,不同蛋白質中tyr、phe、trp的含量有差別,如白明膠蛋白,因不含有這類氨基酸而不適合用紫外法。因此,用紫外分光光度法測定蛋白質濃度是粗略的,不適合用於比較不同蛋白質濃度,更適合在蛋白質純化過程中尋找蛋白質峰。

相對應其他方法(雙老鍵縮脲、卡瑪斯亮藍法)更簡便、快捷,而且測後樣品可以**。

由於各種天然氨基酸都有280nm的光吸收特徵,據此可以作為紫外吸收法定性測蛋白質的依據。( )

4樓:考試資料網

答案】:錯誤phe(f)、trp(w)、和仿慶慶tyr(y)具有芳香性側鏈,這三個氨基差首酸在280nm附近備握有光吸收特性。

對蛋白質可通過測定()nm光吸收進行定量分析有貢獻的氨基酸是()。

5樓:科技打工人

對蛋白質可通過測定()nm光激迅吸收進行定量分數高析有貢獻的氨基酸是()。

脯氨酸。酪氨明畢此酸。

色氨酸。蛋氨酸。

正確答案:c

求 怎樣用紫外分光光度法測蛋白質含量

6樓:信必鑫服務平臺

nm的光吸收法。

用標準曲線法進行測定。標準蛋白質溶液配製的濃度為 mg/ml。常用的標準蛋白質為牛血清清蛋白(bsa)。

nm和260 nm的吸收差法。

核酸對紫外光有很強的吸收,在280 nm處的吸收比蛋白質強10倍(每克),但核酸在260 nm處的吸收更強,其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm處的消光係數是280 nm處的2倍;而蛋白質則相反,其280 nm的紫外吸收值大於260 nm的吸收值。

nm與225 nm的吸收差法。

蛋白質的稀溶液由於含量低而不能使用280 nm的光吸收測定時,可用215nm與225 nm吸收值之差,通過標準曲線法來測定蛋白質稀溶液的濃度。

4、肽鍵測定法。

蛋白質溶液在238 nm處的光吸收的強弱,與肽鍵的多少成正比。因此可以用標準蛋白質溶液配製一系列50~500 mg/ml已知濃度的 ml蛋白質溶液,測定238 nm的光吸收值a238,以a238為縱座標,蛋白質含量為橫座標,繪製出標準曲線。未知樣品的濃度即可由標準曲線求得。

分光光度法測氨基酸含量注意事項

7樓:夜空中最亮的星

1.樣品製備:樣品應當選擇純度高、含量穩定的氨基酸。樣品的製備應當嚴格按照規定的方法進行,避免雜質的干擾。

2.標準曲線的制定:標準曲線應當在相同的實驗條件下制定,以保證結果的準確性。

3.實驗條件的控制:實驗的過程中應當控制好溫度、光照等條件,以避耐櫻免實驗誤差的產生。

4.超純水的使用:在製備樣品和溶液的過程中應當使用超純水,以保證溶液中雜質的最小化。

5.儀器的校準:在進行實驗之前應當對儀器進行校準,以保證分光櫻畝尺光度法的準確性。

6.實驗資料的處理:實驗資料應當經過統計分析、平均值和標準差計算等處理,以得到可靠脊高的結果。

紫外分光光度法測定蛋白質含量的方法有何優缺點受哪些因素的影響和限制

8樓:

紫外分光光度復法測定製蛋白質含量的方bai法有何優缺點?受哪些du因素的影響和限制。

zhi?dao

答:優點是:方法簡單、靈敏、快速、高選擇性,且穩定性好,不消耗樣品,低濃度的鹽類不干擾測定。

缺點是:儀器昂貴,而且不同的蛋白質的紫外吸收是不相同的,測定結果存在著一定的誤差,受光源、溶液的ph值、比色皿材質、緩衝介質溶液等因素的影響和限制。

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