能不能幫我設計生物化學實驗,能不能幫我設計一個生物化學實驗???

2021-08-16 04:47:25 字數 1467 閱讀 7974

1樓:匿名使用者

實驗二 氨基酸的分離鑑定――紙層析法

一、目的

通過氨基酸的分離,學習紙層析法的基本原理及操作方法。

二、原理

紙層析法是用濾紙作為惰性支援物的分配層析法。

層析溶劑由有機溶劑和水組成。

物質被分離後在紙層析圖譜上的位置是用rf值(比移)來表示的:

rf = 原點到層析中心的距離 / 原點到容劑前沿的距離

在一定的條件下某種物質的rf值是常數。rf值的大小與物質的結構、性質、溶劑系統、層析濾紙的質量和層析溫度等因素有關。本實驗利用紙層析法分離氨基酸。

三、器材

1、層析缸 2、毛細管 3、噴霧器 4、培養皿 5、層析濾紙(新華一號)

四、試劑

1、擴充套件劑 650ml

是4份水飽和的正丁醇和1份醋酸的混合物。將20 ml正丁醇和5 ml冰醋酸放人分液漏斗中,與15ml水混合,充分振盪,靜置後分層,放出下層水層。取漏斗內的擴充套件劑約5ml置於小燒杯中做平衡溶劑,其餘的倒人培養皿中備用。

2、氨基酸溶液 0.5%的賴氨酸、脯氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸溶液及它們的混合液(各組份濃度均為0.5%)。各5ml

3、顯色劑 50~looml0.1%水合茚三酮正丁醇溶液。

五、操作

1、將盛有平衡溶劑的小燒杯置於密閉的層析缸中。

2、取層析濾紙(長22 cm、寬14 cm)一張。在紙的一端距邊緣2~3 cm處用鉛筆劃一條直線,在此直線上每間隔2cm作一記號。

3、點樣用毛細管將各氨基酸樣品分別點在這6個位置上,幹後再點一次。每點在紙上擴散的直徑,最大不超過3 mm。

4、擴充套件 用線將濾紙縫成筒狀,紙的兩邊不能接觸。將盛有約20 ml擴充套件劑的培養皿迅速置於密閉的層析缸中,並將濾紙直立於培養皿中(點樣的一端在下,擴充套件劑的液麵需低於點樣線1 cm)。待溶劑上升15―20 cm時即取出濾紙,鉛筆描出溶劑前沿界線,自然乾燥或用吹風機熱風吹乾。

5、顯色 用噴霧器均勻噴上0。1%茚三酮正丁醇溶液,然後置烘箱中烘烤5分鐘(100℃)或用熱風吹乾即可顯出各層析斑點。

6、計算各種氨基酸的rf值。

思 考 題

1、何謂紙層析法?

2、何謂及f值?影響只f值的主要因素是什麼?

3、怎樣製備擴充套件劑?

4、層析缸中平衡溶劑的作用是什麼?

2樓:天藍依然乘風

實驗就要自己設計啊,要別人幫你設計還有什麼意思?別人只是能給你提供下題材和方向.你說了你做過蛋白質含量的測定,蛋白質含量有很多測定方法,你是否都用過呢?

比如現在奶粉問題就因為先前他們用凱式定氮,所以查不出三聚氰胺,用雙縮尿和烤馬式亮藍等方法卻能清楚的檢測出,你可以比較他們的異同並指出起原因啊.

誰能幫我想出一個生化實驗課題

3樓:

先說說你的具體用途啊

寫文章還是具體去操作實驗啊,如果後者的話要聯絡實驗室的實際條件的

能不能幫我把這段德語化學文獻翻譯一下,我將非常感激

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