在高效液相色譜中梯度洗脫裝置的作用是什麼

2021-03-03 21:55:52 字數 1637 閱讀 1567

1樓:匿名使用者

梯度洗脫裝置分兩種:

高壓梯度:用兩臺高壓輸液泵將兩種溶劑輸入

低壓梯度:在常壓下將兩種溶劑(或多元溶劑)混合,然後用高壓輸液泵將流動相輸入到色譜柱中。

梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時間、降低最小檢測量和提高分離精度。

但在使用中,梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。

梯度洗脫時應注意:

1、注意各溶劑間的互溶性。

2、對溶劑的純度要求更高(影響重現性)。

3、注意梯度變化時系統壓力的變化,防止超出限度。

4、梯度結束後,用初始流動相沖洗,使柱子平衡一段時間(再生),使系統回覆到初始狀態。(梯度週期)

5、低壓梯度要注意脫氣,混合後容易產生氣泡。

6、容易出現鬼峰,應作空白試驗。

7、梯度選擇時儘量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。

8、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇性檢測器(如紫外吸收檢測器或熒光檢測器),而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器(如示差折光檢測器)。

9、要注意水相中鹽的濃度,防止在有機相提升過程中鹽的析出。

高效液相色譜分析法中為什麼要採用梯度淋洗

2樓:深水◇靜流

梯度洗脫(gradient elution)又稱為梯度淋洗或程式洗提。

在氣相色譜中,為了改善對寬沸程樣品的分離和縮分析間週期,廣泛採用程式升溫的方法。而在液相色譜中則採用梯度洗脫的方法。在同一個分析週期中,按一定程度不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。

從而可以使一個複雜樣品中的性質差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。

梯度洗脫的優點:1.縮短分析週期;2.提高分離能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。

梯度洗脫的原理: 流動相由幾種不同極性的溶劑組成,通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性,使每個流出的組分都有合適的容量因子k',並使樣品種的所有組分可在最短時間內實現最佳分離。

梯度洗脫特點: 提高柱效改善檢測器的靈敏度當樣品中的一個峰的k'值和最後一個峰的k'值相差幾十倍至幾百倍時,使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩定,必須使用恆流泵,否則難獲重複結果。

3樓:匿名使用者

朋友,為了節省分析時間

高效液相色譜分析法中為什麼採用梯度淋洗

4樓:千葉雅之

梯度淋洗,就是程式洗脫,簡稱就是梯度。

主要就是變化流動相比例。主要目

的就是為了分離樣品,其次還有減短分析時間,改善峰型,提高靈敏度等等。

比如這個梯度,流動相a是磷酸鹽水相,b是乙腈保留時間(min)  乙腈(%)

0                            1020                          3030                          3032                          1040                          10相當於這種狀態

就是從0-20min這段時間,逐步往裡面加入乙腈,這樣的話有助於極性相似的物質分離。如果是裡面有一個極性比較小的物質,那麼乙腈量增大,這個物質出峰時間就會提前。減短了分析時間。

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