1樓:布書琴
一、壓力太大,這是 hplc 使用中的常見問題,是指壓力突然公升高。
解決方法:1、一般是由於流路堵塞造成的。 在這一點上,我們應該檢查部分。
2、首先斷開真空幫浦的入口弊鍵。 此時peek管內充滿液體,使peek管低於溶劑瓶,看液體是否自由滴落。 如果液體不滴落或滴落緩慢,則溶劑過濾頭堵塞。
處理方法:用30%的硝酸浸泡半小時,然後用超純水沖洗乾淨。 如果液體自由滴落,則溶劑濾頭正常,檢查;
3、開啟吹掃閥,使流動相不通過色譜柱。 如果壓力沒有明顯下降,則過濾器白頭被阻塞。 處理方法:
取出過濾後的白頭粉刺,用10%異丙醇超聲半小時。 如果壓力降到100psi以下,過濾白頭正常,檢查;
4、拆下色譜柱的出口端。 如果壓力沒有下降,則色譜柱被堵塞。 處理方法:
如果緩衝鹽早山堵塞,用95%的水沖洗,直至壓力正常。 如果某些強保留物質導致堵塞,請用比當前流動相更強的流動相沖洗,直到壓力正常為止。如果按上述方法沖洗壓力長時間沒有下降,可以考慮將色譜柱的進出口反接儀器,用流動相沖洗色譜柱。
這時候如果柱壓還是不下降,只能更換柱入口篩板,但一旦不操作,很容易造成柱效下降,儘量少用。 如果問題無法解決,請考慮更換色譜柱。流量設定不正確:
可以重新設定正確的流量。流動相配比不正確:不同配比的流動相粘度係數不同,粘度較高的流動相對應的系統壓力也較大。
如果可能,更換粘度較低的溶劑或重新設定比率。系統壓力零漂:調整壓力感測器的零點。
二、壓力過低。
解決方法:1、通常由於系統洩漏,處理方法:找到各個介面,尤其是色譜柱兩端的介面,將洩漏處擰緊。 取下色譜柱並用適當的力將其擰緊或用 ptfe 薄膜襯裡。
2、空氣已進入幫浦內,但此時壓力往往不穩定、波動,甚至更嚴重的幫浦將無法吸出液體。 處理方法:開啟purge閥,以3~5ml/min的流速沖洗。
如果沒有,請用注射器通過外力將排空閥處的氣泡吸出。
3、無流動相流出:檢查儲液瓶中是否有流動相,水槽是否浸入流動相中,幫浦是否運轉。
柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要陸卜中密切注意的地方,柱壓的穩定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關。所謂柱壓穩定並不是指壓力值穩定於乙個恆定值而是指壓力波動範圍在345kpa 以內或在50psi之間(在使用梯度洗脫時,柱壓平穩緩慢的變化是允許的)。壓力過高、過低都屬於柱壓問題。
2樓:吾安琪
柱壓問題是使用液相色譜過程中需要密切注意的地方,柱壓的穩定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關。所謂柱壓穩定並不是指壓力值穩定於乙個恆定值而是指壓力波動範圍在50psi之間(在使用梯度洗脫時,柱壓平穩緩慢的變化春敏掘是允許的)。壓力過高、過低都屬於柱壓問題。
1 壓力過高這是液相在使用中zui常見的問題,指的是壓力突然公升高,一般都是由於流路中有堵塞的原因。此時,我們應該分段進行檢查。
1).首先斷開真空幫浦的入口處,此時peek管裡充滿液體,使peek管低於溶劑瓶,看液體是否自由滴下,如果液體不滴或緩慢滴下,則是溶劑過濾頭堵塞。處理方法:
用30%的硝酸浸泡半個小時,在用超純水沖洗乾淨。如果液體自由滴下,溶劑過濾頭正常,在檢查;
2).開啟purge閥,使流動相不經過柱子,如果壓力沒有明顯下降,則是過濾白頭堵塞。處理方法:
將過濾白頭取出,用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至100psi以下,過濾白頭正常,在檢查;
3).把色譜柱出口端取下,如果壓力不下降,則是柱子堵塞。處理方法:
如果是緩衝鹽堵塞,則用95%的水衝至壓力正常。如果是一些強保留的物質導致堵塞,則要用比現在流動相更強的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀扒核器上,用流動相沖洗柱子。
這時,如果柱壓仍不下降,只有換柱子入口篩板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以儘量少用。
2 壓力過低壓力過低的現象一般是由於系統洩漏,處理方法:尋找各個介面處,特別是色譜柱兩端的介面,把洩漏的地方旋緊即可。當然還有乙個原因就是幫浦裡進了空氣,但此時表現的往往是壓力不穩,忽高忽低,更嚴重一點會導致幫浦無法吸上液體。
處理方法:開啟purge閥,用3~5ml/min的流速沖洗,如果不行,則要用針筒在排空閥處借住外力將拿行氣泡吸出。
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