載體上抗性基因的存在有利於對目的基因是否表達進行檢測

2021-05-10 20:19:37 字數 2026 閱讀 9443

1樓:匿名使用者

同意二樓的前面一段解釋,但後面「只有目的載體上有目的基因和抗性基因。。。,而沒有目的基因的菌就因為沒有抗性而死亡」的闡述有問題。多數情況下,一般都是載體本身主含有相關抗性基因,這個時候目的基因僅僅指的是插入的外源基因,你推論的:

目的基因=目的基因(我的理解是外源基因)+抗性基因,就完全有誤。當然,如果你的目的基因本身是另個一種抗性基因那就又是另個一個故事了。比如,pet-42b載體,它本身含有kana抗性,但你一定要它的宿主在amp抗性的培養基裡生長而引入amp抗性基因,這種概念重疊的情況,我們另當別論。

一般對於細胞本身來講,抗性基因,既不是目的基因表達的充分條件,也不是表達的必要條件。一個很簡單的例子,就是自**體。相信做克隆人都遇到過,它是導致酶連轉後出現假陽性的主要原因。

自**體匯入細胞後,在相應的抗性培養環境下,細胞仍然可以存活,但它不含目的基因,更談不上表達。

2樓:匿名使用者

對的,可以把抗性基因作標記基因,用相應的抗體就能檢測了。

抗性基因或標記基因在質粒上的話,它怎麼起到檢驗目的基因的作用?

3樓:養你過年吃肉

抗性基因或標copy

記基因在質粒上是為了bai檢驗質粒是

du否被轉入菌體中。zhi

如果你的質粒是已經構建好,而且dao鑑定正確的,沒有空載體質粒,那麼,當你轉化後,在篩選平板上轉化(因為轉化不是100%的效率,有些菌是沒有質粒轉入的),只有轉入了該質粒的菌才能長起來,也就意味著這菌是帶有你的目的基因。另外,抗性基因和標記基因(如營養缺陷基因)給予菌體以選擇壓力,有利於質粒在菌體內的大量擴增。

另一種情況,比如你做連線實驗,把目的基因片段和酶切質粒連線,這時,連線效率更不會是100%,當你把連線產物轉入感受態細菌,只要轉入了該質粒(無論是空載體還是陽性載體),菌都能長起來,沒轉入的就長不起來,起到第一步篩選。要篩選你的陽性克隆,還需進一步檢驗,比如pcr或者提質粒酶切。

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4樓:匿名使用者

沒有必然聯絡,目的基因無法直接檢測出是否成功匯入,要看是否有相應翻譯出的蛋白質。

標記基因就是為了更簡便的檢測出目的基因的匯入,便於篩選、培養而插入的。

5樓:匿名使用者

質粒上既有抗性基因又有目的基因,抗性基因較容易檢出,則可確定含目的基因的表達載體質粒已匯入受體細胞。

6樓:塞森巴茂彥

抗性bai基因是放在特定的條du件下檢測的、所以有就zhi能活dao,沒有就不能回

活。所以抗性基因是一種標答記基因,有利於篩選含重組dna的細胞。對於你說的質粒上的基因對於大腸桿菌,極少數可以存活吧。那種是發生了基因突變活基因重組。

關於基因工程運載工具的一道題目

7樓:isabella時光紀

1.有些抄目的基因並不襲是直接表達在生物體的性狀上的,所以不一定能看到目的基因是不是匯入成功表達了,也沒法檢驗它是不是被分解了,匯入抗性基因後就不一樣了,比如匯入抗四環素基因後,把細菌放到四環素中,我們就可以確定沒有死亡的細菌就是成功匯入目的基因並且成功表達了。

2.是成功匯入的標誌,但還不能確定是否會正常表達3.一般情況下都會成功的

4.= =

8樓:匿名使用者

目的基因bai匯入成功後不一定能表du達,而標記基因如:抗抗zhi生素基因一般是

dao可以在宿主回

細胞中表達的,因此可答以用標記基因來檢測目的基因是否匯入成功,而目的基因是否表達,則要檢測相應的蛋白質或性狀。

這樣你能明白了嗎?

9樓:風研掠影

1在一定條件下,抗性基因表達,有抗性基因的細胞存活2我認為不是

3沒有必然聯絡,因為是在統一載體上,所以一般一個成功另一個也會成功4只在一定情況下表達

10樓:

抗性基因的目的是為了檢測基因片段是否匯入成功,匯入的基因片段是否成功表達可以有別的辦法裡來檢測,比如說gfp。

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基因的運輸工具 運載體 要將一個外源基因,如上面所說的抗蟲基因,送入受體細胞,如棉細胞,還需要有運輸工具,這就是運載體。作為運載體的物質必須具備以下條件 能夠在宿主細胞中複製並穩定地儲存 具有多個限制酶切點,以便與外源基因連線 具有某些標記基因,便於進行篩選。目前,符合上述條件並經常使用的運載體有質...

運載體上必須有標記基因,以此來了解目的基因是否表達這句話為

很簡單,插 bai入失活。剛 du好沒有標記基因,zhi 卻是驗證了表達。要是從更加dao詳細來看,版運載體上有標記權基因並不能夠了解是否表達,只能是確定了轉化或者轉染,要是想驗證表達,必須從蛋白層面上看。驗證目的基因表達需要抗體驗證,基因只是能夠證明有此基因,並不一定跟表達相關。如有其它不明,敬請...