1樓：北京索萊寶科技****
1、質粒載體
pbr322 2、克隆載體 3、表達質粒載體真核細胞常見表達載體 .pcmvp-neo-ban載體 特點:該真核細胞表達載體分子量為6600鹼基對,主要由cmvp啟動子、兔β-球蛋白基因內含子、聚腺嘌呤、氨青黴素抗性基因和抗neo基因以及pbr322骨架構成,在大多數真核細胞內都能高水平穩定地表達外源目的基因.
pegfp,增強型絛色熒光蛋白表達載體(enhanced fluorecent protein vector) 特點:pegfp表達載體中含有綠色熒光蛋白,在pcmv啟動子驅動下,在真核細胞中高水平表達.載體骨架中的sv40 origin使該載體在任何表達sv40 t 抗原的真核細胞內進行復制.
pegft-actin,增強型綠色熒光蛋白/人肌動蛋白表達載體 特點:pegfp-actin表達載體中含有綠色熒光蛋白和人胞漿β-肌動蛋白基因,在pcmv啟動子驅動下,在真核細胞中高水平表達.載體骨架中的sv40 origin使該載體在任何表達sv40 t 抗原的真核細胞內進行復制.
啟動子有哪些
2樓：安吉昆蟲
啟動子是dna鏈上一段能與rna聚合酶結合並能起始mrna合成的序列，它是基因表達不可缺少的重要調控序列。沒有啟動子，基因就不能轉錄。原核生物啟動子是由兩段彼此分開且又高度保守的核苷酸序列組成，對mrna的合成極為重要。
啟動子區域：
（1）pribnow盒，位於轉錄起始位點上游5—10bp，一般由6～8個鹼基組成，富含a和t，故又稱為tata盒或—10區。啟動子**不同，pribnow盒的鹼基順序稍有變化。
（2）—35區，位於轉錄起始位點上游35bp處，故稱—35區，一般由10個鹼基組成。
啟動子有強弱之分，雖然原核細胞僅靠一種rna聚合酶就能負責所有rna的合成，但它卻不能識別真核基因的啟動子。為了表達真核基因，必須將其克隆在原核啟動子的下游，才在原核表達系統中被轉錄。在原核生物表達系統中，通常使用的可調控的強啟動子有lac (乳糖啟動子)、trp (色氨酸啟動子)、pl和pr(λ噬菌體的左向和右向啟動子)以及tac（乳糖和色氨酸的雜合啟動子)等。
3樓：神無幸村
原核表達系統中通常使用的可調控的啟動子有lac(乳糖啟動子)、trp(色氨酸
啟動子)、tac(乳糖和色氨酸的雜合啟動子) 、lpl (l噬菌體的左向啟動子)、t7噬菌體啟動子等。
（1）lac啟動子：它來自大腸桿菌的乳糖操縱子，是dna分子上一段有方向的核苷酸序列，由阻遏蛋白基因(laci)、啟動基因(p)、操縱基因(o)和編碼3個與乳糖利用有關的酶的基因結構所組成。lac啟動子受分解代謝系統的正調控和阻遏物的負調控。
正調控通過cap(catabolite gene activation protein)因子和camp來啟用啟動子，促使轉錄進行。負調控則是由調節基因產生lacz阻遏蛋白，該阻遏蛋白能與操縱基因結合阻止轉錄。乳糖及某些類似物如iptg可與阻遏蛋白形成複合物，使其構型改變，不能與o基因結合，從而解除這種阻遏，誘導轉錄發生。
（2）trp啟動子：它來自大腸桿菌的色氨酸操縱子，其阻遏蛋白必須與色氨酸結合才有活性。當缺乏色氨酸時，該啟動子開始轉錄。
當色氨酸較豐富時，則停止轉錄。b-吲哚丙烯酸可競爭性抑制色氨酸與阻遏蛋白的結合，解除阻遏蛋白的活性，促使trp啟動子轉錄。
（3）tac啟動子：tac啟動子是一組由lac和trp啟動子人工構建的雜合啟動子，受lac阻遏蛋白的負調節，它的啟動能力比lac和trp都強。其中tac 1是由trp啟動子的－35區加上一個合成的46 bp dn**段(包括pribnow 盒)和lac操縱基因構成，tac 12是由trp的啟動子-35區和lac啟動子的-10區，加上lac操縱子中的操縱基因部分和sd序列融合而成。
tac啟動子受iptg的誘導。
（4）lpl啟動子：它來自l噬菌體早期左向轉錄啟動子，是一種活性比trp啟動子高11倍左右的強啟動子。lpl啟動子受控於溫度敏感的阻遏物 cits857。
在低溫(30℃)時，cits857阻遏蛋白可阻遏pl啟動子轉錄。在高溫(45℃)時，cits857蛋白失活，阻遏解除，促使pl啟動子轉錄。系統由於受cits857作用，尤其適合於表達對大腸桿菌有毒的基因產物，缺點是溫度轉換不僅可誘導pl啟動子，也可誘導熱休克基因，其中有一些熱休克基因編碼蛋白酶。
如果用l噬菌體ci+溶源菌，並用絲裂黴素c或萘啶酮酸進行誘導，可緩解這一矛盾。
（5）t7噬菌體啟動子：它是來自t7噬菌體的啟動子，具有高度的特異性，只有t7rna聚合酶才能使其啟動，故可以使克隆化基因獨自得到表達。t7rna聚合酶的效率比大腸桿菌 rna聚合酶高5倍左右，它能使質粒沿模板連續轉錄幾周，許多外源終止子都不能有效地終止它的序列，因此它可轉錄某些不能被大腸桿菌rna聚合酶有效轉錄的序列。
這個系統可以高效表達其他系統不能有效表達的基因。但要注意用這種啟動子時宿主中必須含有t7rna聚合酶。應用t7噬菌體表達系統需要2個條件：
第一是具有t7噬菌體rna聚合酶，它可以由感染的l噬菌體或由插入大腸桿菌染色體上的一個基因拷貝產生；第二是在一個待表達基因上游帶有t7噬菌體啟動子的載體。
真核生物的啟動子和原核生物的啟動子的結構有什麼區別
4樓：薔祀
1、真核生物的啟動子和原核生物的啟動子的結構序列不同：原核生物啟動子序列明顯一致；真核不同啟動子間不像原核那樣有明顯共同一致的序列，而且單靠rna聚合酶難以結合dna而起動轉錄，而是需要多種蛋白質因子的相互協調作用。
2、真核生物的啟動子和原核生物的啟動子的結構長度不同：原核生物的啟動子的結構長度較短；真核啟動子一般包括轉錄起始點及其上游約100-200bp序列,包含有若干具有獨立功能的dna序列元件,每個元件約長7-30bp。
3、真核生物的啟動子和原核生物的啟動子的終止結構不同：原核生物啟動子一般在基因或操縱子的終末往往具有特殊的終止順序,它可使轉錄終止和rna聚合酶從dna鏈上脫落。
真核基因啟動子是在基因轉錄起始位點（+ 1）及其5』上游近端大約100~200bp以內（或下游100bp）的一組具有獨立功能的dna序列,每個元件長度約為7~20bp,是決定rna聚合酶轉錄起始和轉錄頻率的關鍵元件。
擴充套件資料：
啟動子的基本構成有以下幾點：
1、轉錄單元：
轉錄單元（transcription unit) 是一段從啟動子開始至終止子（terminator）結束的dna序列，rna聚合酶從轉錄起點開始沿著模板前進，直到終止子為止，轉錄出一條rna鏈。在細胞中，一個轉錄單元可以是一個基因，也可以是幾個基因。
2、轉錄起點：
轉錄起點是指與新生rna鏈第一個核苷酸相對應dna鏈上的鹼基，研究證實通常為一個嘌呤。常把起點前面，即5』末端的序列稱為上游（upstream），而把其後而即3』末端的序列稱為下游（downstream）。
在描述鹼基的位置時，一般用數字表示，起點為+1，下游方向依次為+2、+3……，上游方向依次為-1、-2、-3……。
3、啟動子區：
啟動子區是rna聚合酶的結合區，其結構直接關係到轉錄的效率。在被保護區內有一個由5個核苷酸組成的共同序列，是rna聚合酶的緊密結合點，稱為pribnow區（pribnow box），這個區的**大約位於起點上游10bp處，所以又稱為-10區。
許多原核生物都含有這兩個重要的啟動子區：rna聚合酶同啟動子結合的區域稱為啟動子區。將各種原核基因同rna聚合酶全酶結合後，用dnase i水解dna，最後得到與rna聚合酶結合而未被水解的dn**段，這些片段有一個由5個核苷酸（tataa）組成的共同序列。
4、-10位區和-35位區：
rna聚合酶並不能重新結合或並不能選擇正確的起始點，表明在保護區外可能還存在與rna聚合酶對啟動子的識別有關的序列。果然，科學家不久就從噬菌體的左、右啟動子pl及pr和sy40啟動子的-35 bp附近找到了另一段共同序列：ttgaca。
原核生物中-10區同-35區之間核苷酸數目的變動會影響基因轉錄活性的高低，強啟動子一般為17±1 bp，當間距小於15 bp或大於20 bp時都會降低啟動子的活性。
5樓：聽風
一、原核生物啟動子：
在基因或操縱子的終末往往具有特殊的終止順序,它可使轉錄終
止和rna聚合酶從dna鏈上脫落。
原核生物啟動子序列包括：cap序列，增強聚合酶的結合和轉錄的起始序列（-70~-40）；識別區（-35）；解旋區（-10）；轉錄起始位（+1）
典型轉錄終止子的特徵：莖環結構，富含gc；含4個以上的u。
例如大腸桿菌色氨酸操縱子後尾含有40bp的gc豐富區，其後緊跟at豐富區，這就是轉錄終止子的結構。
終止子有強、弱之分，強終止子含有反向重複順序，可形成莖環結構，其後面為polyt結構，這樣的終止子無需終止蛋白參與即可以使轉錄終止。
而弱終止子儘管也有反向重複序列，但無polyt結構，需要有終止蛋白參與才能使轉錄終止。
二、真核生物啟動子：
啟動子（promoter）：真核基因啟動子是在基因轉錄起始位點（+ 1）及其5』上游近端大約100~200bp以內（或下游100bp）的一組具有獨立功能的dna序列，每個元件長度約為7~20bp，是決定rna聚合酶轉錄起始和轉錄頻率的關鍵元件。
啟動子包括：
1.核心啟動子（core promoter）：是指足以使rna聚合酶ⅱ轉錄正常起始所必需的、最少的dna序列。
其中包括轉錄起始位點或起始子（initiator）（+1）：一般是a或g及轉錄起始位點上游-25/-30bp處富含ta的典型元件tata框。
2.上游啟動子元件(upstream promoter element，upe)：包括通常-70bp附近的caat框：
ggccaatct和gc框：gggcgg等，能通過tfⅱ-d複合物調節轉錄起始的頻率，提高轉錄效率。
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a 基bai因工程經常以抗生素du抗性基因為標記基因，a錯誤zhi dao b 通過轉基因技術可獲版得抗蟲的糧食作物，這樣權可以減少農藥使用，糧食的產量也有所增加，b正確 c 在基因工程，通常使用同一種限制酶切割目的基因和運載體，使它們產生相同的黏性末端，以便形成重組質粒，c錯誤 d 基因工程中常用...
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目前世界許多國家將生物 技術，資訊科技和新材料技術作為三大重中之重技術，而生物技術可以分為傳統生物技術，工業生物發酵技術和現代生物技術。現在人們常說的生物技術實際上就是現代生物技術。現代生物技術包括基因工程 蛋白質工程 細胞工程 酶工程和發酵工程等五大工程技術。其中基因工程技術是現代生物技術的核心技...
基因工程運載體，基因工程運載體的必備條件
目的基因單獨匯入受體細胞很難而且也無法直接與受體細胞的基因結合。一方面需要用它作為運載工具，將目的基因轉移到宿主細胞中去 另一方面利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量的複製 稱為克隆 作為運載體必須具有三個條件 在宿主細胞中能儲存下來並能大量複製 有多個限制酶切點，而且每種酶的切點最好只有一個 有一...