westernblot中為什麼要確定標準曲線

2021-03-03 21:58:47 字數 863 閱讀 3609

1樓:匿名使用者

一般western blot我都不需要標準曲線,設定好陽性和陰性對照基本可以進行定性的檢測,如果定量檢測蛋白,我推薦elisa,更適於定量檢測。

2樓:匿名使用者

如果你要用western blot方法去對蛋白質進行處理,你當然要在上前進行標曲的處理,以判斷蛋白質的量,這樣你的最後條帶強度會更適合。

3樓:蘑菇龜龜

就類似與測酶活需要標準曲線是一樣的!

為什麼western blot結果中,蛋白質檢測分子量會與計算大小不同

4樓:匿名使用者

western blot檢測的結果與理論計算值有差異是非常正常的事情

western blot檢測最重要的意義在於目的蛋白在某細胞或組織中表達情況的定性。而目的蛋白檢測的大小取決於目的蛋白在sds-page的結果,也就是說如果目的蛋白在sds-page上檢測結果是偏大的,那麼在western blot轉膜後也會是偏大的,這和目的蛋白的結構(糖基化修飾),,組成等等都有關係。所以只是一個相對的分子量的結果。

要精確檢測目的蛋白的分子量結果需要做()檢測

western blot 為什麼要用二抗?直接標記一抗不行嗎?

5樓:螞蟻

之所以用二抗,是因為二抗是帶有酶標的抗體,它跟一抗結合之後可以**顯影。如果你的一抗上面直接帶有酶標物,那可以不用二抗直接**。但是一般你的一抗都是少數應用的,廠家不會大批量生產,就不會費勁給它加酶標。

6樓:匿名使用者

一方面是為了顯影啥的 主要還是是為了增強特異性 放大訊號

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