免疫熒光的標本怎麼製作,免疫熒光染色的詳細步驟及應注意的細節

2021-03-03 21:44:18 字數 768 閱讀 2356

1樓:南京金益柏生物科技****

免疫熒光的標本製作的基本程式和dab顯色的組化類似:

1 免疫熒光不需要使用雙氧水處理,封閉和一抗孵育與其它相同2 免疫熒光的二抗使用不同熒游標記的二抗孵育,孵育時間根據抗體的工作濃度確定

3 二抗孵育之後充分洗片後即可貼片、封片和觀察4、免疫熒光在封片使用專用封片劑(如果你經費比較充足)或甘油:0.01mpbs (7:3)

5 封片後的標本4度冰箱儲存,照像後可以在-70度的冰箱儲存備用6 條件許可可以購買防淬滅的試劑加入封片劑中,標本可以儲存更久7 熒光抗體的孵育以及後續處理需要閉光

8 熒光抗體染色假陽性可能會多,需要設定陽性和陰性對照

免疫熒光染色的詳細步驟及應注意的細節

2樓:南京金益柏生物科技****

免疫熒光染色方法快捷,靈敏.

標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間.

選用較佳的一抗的工作濃度.

二抗需a液b液在室溫混合15分鐘後再用.

標本需儲存在-20度.

免疫熒光染色與活死染色可以一起做嗎

3樓:南京金益柏生物科技****

免疫熒光染色方法快捷,靈敏.

標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間.

選用較佳的一抗的工作濃度.

二抗需a液b液在室溫混合15分鐘後再用.

標本需儲存在-20度.

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可以用image pro plus分析灰度 求助免疫熒光pi染核問題 細胞試驗指南上dapi染核是在孵育完二抗之後,估計pi也可以在這時加。在論壇中查到的濃度不一,有10 50 m,有5ug 20ug ml,作用時間有5 30min不等,染完後pbs洗3遍,封片。用535 nm激發波長,615 nm...