典型的DNA重組實驗通常包括哪些步驟

2023-05-17 16:50:08 字數 2413 閱讀 6372

1樓:遠巨集

重組dna技術主要包括四個步驟:提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因匯入受體細胞、目的基因的檢測和表達。

1、提取目的基因:

獲取目的基因主要有兩條途徑:一條是從供體細胞的dna中直接分離基因;另一條是人工合成基因。直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,又叫「散彈射擊法」。

2、目的基因與運載體結合:

目的基因與運載體結合的過程實際上是不同**的dna重新組合的過程,是基因工程的核心。

3、將目的基因匯入受體細胞:

用人工方法使體外重組的dna分子轉移到受體細胞,主要是借鑑細菌或病毒侵染細胞的途徑。目的基因匯入受體細胞後,就可以隨著受體細胞的繁殖而複製,由於細菌的繁殖速度非常快,在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。

4、目的基因的檢測和表達:

目的基因匯入受體細胞後,是否可以穩定維持和表達其遺傳特性,只有通過檢測與鑑定才能知道。受體細胞必須表現出特定的性狀,才能說明目的基因完成了表達過程。

2樓:史省三

1、提取供體生物的目的基因(或稱外源基因),酶接連線到另一dna分子上(克隆載體),形成一個新的重組dna分子。

2、將這個重組dna分子轉入受體細胞並在受體細胞中複製儲存,這個過程稱為轉化。

3、對那些吸收了重組dna的受體細胞進行篩選和鑑定。

4、對含有重組dna的細胞進行大量培養,檢測外援基因是否表達。

3樓:

①外源基因的獲得。如酶切法、反轉錄法人工合成法②載體的獲得。質粒、噬菌體③獲得重組體。

重組體匯入受體細胞核。轉化、轉導、雜交、細胞融合、顯微注射技術⑤對吸收重組dna 的細胞進行篩選鑑定。⑥對含有重組dna 細胞進行大量培養,檢測外源基因是否表達。

4樓:多多

目的基因提取。

目的基因與運載體結合。

重組dna分子匯入受體細胞。

目的基因的檢測與表達。

將重組dna匯入細胞內有哪些方法?它們的原理是什麼? 200

5樓:愛是錯怪

(1)將重組質粒匯入原核細胞稱轉化,通常用氯化鈣法使大腸桿菌細胞處於感受態,從而將外源dna匯入細胞。另一個常用方法是用脈衝高壓電瞬間處理,使外源dna高效匯入細胞,稱為電穿孔法。

2)將重組體dna包裝成噬菌體,使外源基因匯入宿主細胞稱轉導,在適宜條件下使轉化率提高。

3)將外源基因匯入動物細胞常用方法有磷酸鈣轉染技術,電穿孔轉染技術,脂質體載體法,deae-葡聚糖轉染技術,顯微注射法等。將外源基因匯入植物細胞常用方法是用ti質粒將外源基因匯入植物的外植體,也可將植物細胞的細胞壁消化,再用將外源基因匯入動物細胞常用方法將外源基因匯入原生質體,再誘導產生細胞壁。還有一個方法,是用基因槍將外源dna射入植物組織或細胞。

6樓:匿名使用者

將外源基因送入受體細胞,需要運載體,目前常用的運載體一般有質粒,噬菌體和動植物病毒。通過細菌或病毒的侵染來將目的基因送入受體細胞內。

7樓:佴聽聞

首先區分概念 dna重組藥物是基因藥物中的一個類別 也就是說 dna重組藥物是屬於基因藥物的 其次,這兩種藥物多是由經過遺傳物質改變的微生物合成的,二者的根本區別在於dna重組藥物裡的遺傳物質改變(包。

重組dna技術包括哪些主要步驟

8樓:義翹神州加油

重組dna技術一般包括以下幾步:

獲得目的基因;

與克隆載體連線,形成新的重組dna分子;

用重組dna分子轉化受體細胞,並能在受體細胞中複製和遺傳;

對轉化子篩選和鑑定;

對獲得外源基因的細胞或生物體通過培養,獲得所需的遺傳性狀或表達出所需要的產物。

在具體工作中選擇哪條技術路線主要取決於基因的**、基因本身的性質和該項遺傳工程的目的。

9樓:匿名使用者

提取目的基因,目的基因與運載體結合。將目的基因匯入受體細胞。目的基因的檢測和表達。

10樓:匿名使用者

pcr擴增,**,酶切,連線,轉化,提質粒。

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