利用RAPD可以鑑定兩個物種嗎?又是怎樣鑑定的

2022-12-02 19:45:10 字數 1377 閱讀 2394

1樓:匿名使用者

可以隨機擴增多型性 dna( rapd) ( random amplified polymorphic dna )和任意引物 pcr(ap-pcr) ( arbitrary primer pcr )

rapd ( random amplified polymorphic dna )是 1990 年美國杜邦公司科學家 j. g. k.

williams 和加利福尼亞生物研究所 j. welsh 領導的兩個小組幾乎同時發展起來的一項新技術。 williams 稱之為 rapd ( random amplified polymorphic dna ) , welsh 稱之為 ap-pcr ( arbitrary primer pcr )。

rapd 技術建立在 pcr 技術基礎上,它是以任意序列的寡核苷酸單鏈 ( 通常為 10 個鹼基, ap-pcr 則為 20 ~ 30 個鹼基 ) 為引物,對所研究的基因組 dna 進行隨機擴增。 rapd 所用的一系列引物的 dna 序列各不相同,但對於任一引物,它同基因組 dna 序列有特定的結合位點。這些特定的結合位點在基因組某些區域內的分佈如符合 pcr 擴增的反應條件,即在一定範圍內模板 dna 上有與引物互補的反相重複序列時,就可擴增出此範圍的 dna 片段。

在不同物種基因組 dna 中,這種反相重複序列的數目和間隔的長短不同,就可導致這些特定的結合位點分佈發生相應的變化,而使 pcr 擴增產物增加、減少或發生分子量的變化。 通過對 pcr 產物的檢測和比較,即可識別這些物種基因組 dna 的多型片段。

與常規 pcr 相比, rapd 主要有以下特點: ① 無需專門設計 rapd 擴增反應的引物,也無需預知被研究的生物基因組核苷酸順序,引物是隨機合成或是任意選定的。引物長度一般為 9 ~ 10 個寡核苷酸。

② 每個 rapd 反應中,僅加單個引物,通過引物和模板 dna 鏈隨機配對實現擴增,擴增沒有特異性。 ③ 退火溫度較低,一般為 36℃ ,這能保證短核苷酸引物與模板的穩定配對,同時也允許了適當的錯誤配對,以擴大引物在基因組 dna 中配對的隨機性。 ④ 較之常規 pcr , rapd 反應易於程式化。

利用一套隨機引物,得到大量 dna 分子標記,可以藉助計算機進行系統分析。

該方法已被廣泛用於遺傳指紋作圖、基因定位、系統進化以及動植物、微生物物種及中藥材的鑑定等各個領域。在生藥鑑定方面,該方法在人蔘及其偽品、甘草、黃連、冬蟲夏草及其偽品、貝母等藥材的鑑定中有應用。

2樓:修宛

rapd可能用來鑑定兩個物種之間的親緣關係,應該不能用來直接鑑定兩個未知物種.

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