我要用CT法做熒光定量PCR,請問需要做標準曲線嗎?關於濃度

2021-04-18 02:33:44 字數 1258 閱讀 7701

1樓:匿名使用者

最好是做標準曲線,要看看擴增效率的。

調cdna就還了~

2樓:匿名使用者

不需要做標準曲線吧?我沒有調rna濃度,你調了也作用不大,畢竟你做反轉錄是mrna的反轉錄,你如果調總rna的濃度也沒多大用啊。如果是mrna濃度調到一致還是可以的。

請問做熒光定量pcr時每次都需要做標準曲線嗎?謝謝!

3樓:匿名使用者

絕對定量只要做一個就行。

相對定量:△△ct法,只用做一次,把目的基因和內參基因的斜率都調整到-3.32左右,兩者相差不超過0.

1,同時r2≥0.99。則之後就可以不用再做了。

不用,標準曲線法需要每次都做!

4樓:百浩生物

有時候感覺是說了廢法,當然是每次都做標準曲線結果更好了。不過如果你邊著做,並且樣品是同一批配的,這個影響不大,上一批的標準曲線可以用於下一批的。

實時熒光定量pcr相對定量用標準曲線法還是2-δδct法,後者還做標準曲線嗎?是不是標準曲線法更準確

5樓:匿名使用者

你的是相對對量用2-δδct法,標準曲線是絕對定量。

6樓:瑩瑩

兩者都可以,我覺得標準曲線法較麻煩,如果你做的次數多的話,每次都要先做下標準曲線。

而2-δδct法不用做標準曲線,但是缺點是:用這種方法的前提是你預設擴增效率一致。

請問做實時熒光定量pcr實驗時,為什麼做標準曲線?

7樓:匿名使用者

1 做標曲才可以算出這對引物的擴增效率(其斜率),方便用pfaffl方法來進行相對定量(得到的結果相對精確一點),否則只能預設擴增效率為2,用2^-ddct(livak)法來計算

2 做標曲才可以絕對定量。

8樓:匿名使用者

標準曲線是已知量的

做了標準曲線可以實現絕對定量

9樓:匿名使用者

絕對定量和相對定量都可以做標準曲線,目的在於用已知濃度樣品的量做成的標準曲線來定未知濃度樣品的量。

我要用ct法做熒光定量pcr,請問需要做標準曲線嗎

10樓:北京索萊寶科技****

最好是做標準曲線,要看看擴增效率的.

調cdna就還了~

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ct ct 試驗樣品 ct 基準樣品 ct 試驗樣品 ct 試驗樣品,目的基因 ct 試驗樣品,內參基因 ct 基準樣品 ct 基準樣品,目的基因 ct 基準樣品,內參基因 2 ct 2 1.2 2.30 用2 ct法處理熒光定量pcr資料時,sd值應該怎麼算 5 因為基本每個樣本都是三個復孔,所以...

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