454的測序原理是什麼,高通量測序分的原理是什麼?

2021-03-03 20:32:47 字數 1409 閱讀 2745

1樓:匿名使用者

454測序原理:

焦磷酸測序依靠生物發光進行dna序列分析的新技術;

在dna聚合酶,atp硫酸化酶,熒光素酶和雙磷酸酶的協同作用下,將引物上每一個dntp的聚合與一次熒光訊號釋放偶聯起來.通過檢測熒光訊號釋放的有無和強度,就可以達到實時測定dna序列的目的.此技術不需要熒游標記的引物或核酸探針,也不需要進行電泳;

具有分析結果快速、準確、靈敏度高和自動化的特點.\x0droche gs flx system是一種基於焦磷酸測序原理而建立起來的高通量基因組測序系統.在測序時,使用了一種叫做「pico titerplate」(ptp)的平板,它含有160多萬個由光纖組成的孔,孔中載有化學發光反應所需的各種酶和底物.

測序開始時,放置在四個單獨的試劑瓶裡的四種鹼基,依照t、a、c、g的順序依次迴圈進入ptp板,每次只進入一個鹼基.如果發生鹼基配對,就會釋放一個焦磷酸.這個焦磷酸在各種酶的作用下,經過一個合成反應和一個化學發光反應,最終將熒光素氧化成氧化熒光素,同時釋放出光訊號.

此反應釋放出的光訊號實時被儀器配置的高靈敏度ccd捕獲到.有一個鹼基和測序模板進行配對,就會捕獲到一分子的光訊號;

由此一一對應,就可以準確、快速地確定待測模板的鹼基序列.

高通量測序分的原理是什麼?

2樓:天涯海角七樓號

對dna分子進行

序列測定。

1.對幾十萬到幾百萬條dna分子進行序列測定和一般讀長較短等為標誌。

2.根據發展歷史、影響力、測序原理和技術不同等,主要有以下幾種:大規模平行簽名測序(massively parallel signature sequencing, mpss)、聚合酶克隆(polony sequencing)、454焦磷酸測序(454 pyrosequencing)、illumina (solexa) sequencing、abi solid sequencing、離子半導體測序(ion semiconductor sequencing)、dna 奈米球測序 (dna nanoball sequencing)等。

3.高通量測序技術是對傳統測序一次革命性的改變,一次對幾十萬到幾百萬條dna分子進行序列測定,因此在有些文獻中稱其為下一代測序技術(next generation sequencing)足見其劃時代的改變,同時高通量測序使得對一個物種的轉錄組和基因組進行細緻全貌的分析成為可能,所以又被稱為深度測序(deep sequencing)。

參考資料

麻煩各位幫我講解一下高通量測序的原理,分別講講454、solexa和solid這三個平臺的原理是怎樣的

3樓:匿名使用者

你這問題太大了,

真不好說,

你去看看各個公司的protocol估計會明白。

有問題發信吧。

什麼是普通的基因測序,它和高通量測序有什麼區別嗎

普通的基因測序 應該是指 常規dna測序 吧,是用sanger法 也就是雙脫氧法 進行測序的方法,目前非常普遍的是直接用abi 3730xl 進行的自動測序,基本上可以做到600bp 800bp的讀長。高通量測序的概念其實是一個相對的概念,在2000年的時候,3700 megabace等儀器上的測序...

高通量測序ycb是什麼?和常規有什麼區別

高通量測序技術是對傳統測序一次革命性的改變,一次對幾十萬到幾百萬條dna分子進行序列測定,因此在有些文獻中稱其為下一代測序技術 next generation sequencing 足見其劃時代的改變,同時高通量測序使得對一個物種的轉錄組和基因組進行細緻全貌的分析成為可能,高通量測序技術 high ...

高通量基因組測序中什麼是測序深度和覆蓋度

可以簡單理解為深度是一條鏈上一個鹼基檢測到的次數,覆蓋度是你檢測到的這個樣本的總鹼基數的百分比 高通量基因組測序中,什麼是測序深度和覆蓋 簡潔版 深度即 測序得到的總鹼基數 基因組鹼基數 也可以理解為將基因組測了幾遍。測序深度能減少假陽性和測序錯誤率。覆蓋度原來是指基因 轉錄組上測序測到的部分佔整個...