單引物PCR對照的原理,請教PCR內標對照

2021-03-03 21:18:13 字數 860 閱讀 8945

1樓:士誠小人也

你理解的很對,那個條帶不大可能是你的目標產物不過一般單引物對照很少有人做的

因為設計引物時,很多時候你是不知道基因組或者模板中dna都是什麼,有的時候單個引物就能擴增出條帶,但這卻不是你想要的,所以做單引物對照,如果跟雙引物結果一樣,說明另一個引物沒起作用,這肯定偏離你的實驗設計

陰性對照是檢測整個反應體系中是否存在核酸汙染的。如果你沒有加入模板,是不應該出現條帶的;如果出現了,則說明反應體系中,酶、buffer、水等裡面混有其它dna,必須查明原因後更換試劑

pcr實驗中設定陰性對照組和單引物對照組的目的是什麼?

2樓:匿名使用者

做pcr的時候 用的水作對照,不管是樣品還是對照組都出現了引物二聚體,而且一.引物設計和樣品使用均是一樣的情況,就是反應條件的問題二.反應條件就看

如何設計對照pcr?每種對照能說明什麼

3樓:啥名字好呢呢呢

對照分為兩種,即陰性對照和陽性對照。陰性對照不加模板,為了驗證pcr體系是否汙染;陽性對照是為了驗證整個pcr體系是否正確以及擴增效率如何。

請教pcr內標 對照

4樓:初夏之橙

內參就是模板中除了你的目的基因,還要有一個這個模板中肯定存在的基因,用來檢測你模板的質量。也就是說,如果在同一模板中,如果你沒擴出目的基因,但擴出了內參,就說明不是模板的問題。

陽性對照就是你的實驗應該出現的結果,就是用你的結果和陽性對照對比用。

陰性對照就是本底,起排除干擾的作用。

關於實驗原理的問題,建議看《分子生物學實驗指南》。

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