1樓：匿名使用者
如果你想做熒光定量pcr的根據實驗思路來說應該需要一下試劑和儀器
1.模板提取（一般為rna）：trizol、氯仿、異丙醇、無水乙醇、depc處理水
2.模板濃度測定：分光光度計或nanodrop
3.逆轉錄：逆轉錄試劑盒（或者一步法試劑盒），這一步可以用普通pcr做，也可以用水域做。
4.熒光定量pcr試劑：通常有用sybr green mix做的，但是這裡建議你用evagreen做，靈敏度和平行性都要好於sybr green，並且如果你那是abi或者stratagene的pcr如果用sybr green還需要加一步rox很麻煩。
5.其他：除了以上的那些還需要離心管、pcr管或板（axygen反應比較好）、移液槍等，暫時就想到這麼多。
做pcr之前，不用計數細胞數，是不是預設細
2樓：匿名使用者
流式細胞計是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特徵參量，並可以根據預選的參量範圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零解析度的儀器，它只能測量一個細胞的諸如總核酸量，總蛋白量等指標，而不能鑑別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。
也就是說，它的細節 解析度為零。流式細胞計可同時進行多引數測量，資訊主要來自特異性熒光訊號及非熒光散射訊號。測量是在測量區進行的，所謂測量區就是照射鐳射束和噴出噴孔的液流束垂直相交點。
液流**的單個細胞通過測量區時，受到鐳射照射會向立體角為2π的整個空間散射光線，散射光的波長和入射光的波長相同。散射光的強度及其空間分佈與細胞的大小、形態、質膜和細胞內部結構密切相關，因為這些生物學引數又和細胞對光線的反射、折射等光學特性有關。未遭受任何損壞的細胞對光線都具有特徵性的散射，因此可利用不同的散射光訊號對不經染色活細胞進行分析和分選。
經過固定的和染色處理的細胞由於光學性質的改變，其散射光訊號當然不同於活細胞。散射光不僅與作為散射中心的細胞的引數相關，還跟散射角、及收集散射光線的立體角等非生物因素有關。
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最好是做標準曲線,要看看擴增效率的.調cdna就還了 我是熒光定量pcr初學者，現在想做定量試驗，最近做了個標準曲線，可是內參和目的基因的點都不 上。可以78 讀板，這樣ct值就只是產物的值了，另外你的ntc可能是汙染了，稀釋的過程中也要防止汙染，尤其是標準品，從溶解曲線上看，確實有非特異性的擴增，...
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最好是做標準曲線，要看看擴增效率的。調cdna就還了 不需要做標準曲線吧?我沒有調rna濃度，你調了也作用不大，畢竟你做反轉錄是mrna的反轉錄，你如果調總rna的濃度也沒多大用啊。如果是mrna濃度調到一致還是可以的。請問做熒光定量pcr時每次都需要做標準曲線嗎？謝謝！絕對定量只要做一個就行。相對...