在良好的結果上設計引物測序為什麼會出現無訊號

2021-03-04 09:23:18 字數 473 閱讀 1615

1樓:

樣品本身被汙染,這常常發生在樣品為質粒和菌液的情況中.當使用通用引物測序時,如果剛好專和樣品中的幾個質屬粒均能結合,那麼就會出現這種情況,而且在同一位置上還可能有不止兩個峰形;樣品不是單一模板,這常常發生在樣品為pcr產物的情況中.由於使用的是特異性引物,因此即使模板中有其他dna的存在,產生干擾的可能性也很小.

通常是由於存在兩條分子量很接近,採用瓊脂糖電泳無法分開的條帶,在測序時就會發生這種情況;

樣品中存在兩個引物結合位點,這常常發生在樣品中存在重複序列的情況下.當引物恰好設計在重複序列中時,那麼在重複序列以外的部分就會出現twopattern的情況;所用的測序引物不純,這種情況一般發生在pcr產物測序中.因為pcr測序一般使用的都是pcr擴增引物,如果引物本身不純,測序結果會出現雙峰.

所以我們測序的引物一般要求都是要經過page純化的;測序樣品序列中存在如重複序列,poly結構,髮夾結構等複雜結構導致測序訊號出現亂峰.

在excel中求和為什麼會出現這樣的符號

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