免疫組化實驗和elisa實驗有什麼區別

2021-03-04 08:30:10 字數 1654 閱讀 6089

1樓:匿名使用者

bai兩者都是基於抗原du

與抗體之間能zhi發生特異性結合這一基dao本原理。

免疫內組化是容對組織標本或細胞標本中的抗原類物質如細胞中的病原體、蛋白質、多肽、氨基酸、多糖、酶、激素、核酸等進行定位或定量檢測,檢測材料是石蠟切片或細胞塗片,檢測時用到的抗體可以用酶標記,也可以用熒光素標記。

酶聯免疫吸附試驗既可以檢測抗原也可以檢測抗體,若檢測抗體,則酶標板需要用抗原包被;若檢測抗原,則酶標板需要用抗體包被。

elisa技術和western的不同是什麼 10

2樓:百優生物

免疫學三大工具,免疫組化、western、elisa,分別用於定位,定性和定量,各有各的功能。

western用於測分子量,elisa用於測濃度。

他們在測量前都要一個尺子(標準),但western的尺子上標的是分子量(kd),elisa的尺子上標的是濃度。

western用的是蛋白marker(已知大小的幾條蛋白),與蛋白一起電泳(不同泳道),實驗結束後知道目標蛋白的大小。

elisa用的是標準品(已知濃度的蛋白,自己稀釋成不同濃度),與未知相本一起反應(不同孔),實驗結束後判斷目標蛋白的濃度。

至於他們的後期原理,都是用抗體與目標蛋白反應,再加一個hrp標記的二抗,hrp可以讓dab顯色(western是dab或者ecl發光,在膜上顯色,而elisa用tmb顯色,顏色在孔裡面,)

當然,實際操作也沒這麼簡單,但後期利用的原理是相當的。

3樓:少陵五老

酶聯免疫吸附試驗

酶聯免疫吸附試驗(又稱酵素免疫分析法,enzyme-linked immunoassay,簡稱elisa)利用抗原抗體之間專一性鍵結之特性,對檢體進行檢測;由於結合於固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設計其鍵結機制後,配合酵素呈色反應,即可顯示特定抗原或抗體是否存在,並可利用呈色之深淺進行定量分析。根據待測樣品與鍵結機制的不同,elisa可設計出各種不同型別的檢測方式,主要以三明治法(sandwich)、間接法(indirect)、以及競爭法(***petitive)三種為主。

western blot

是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法,也是hiv檢測的方法之一。

利用特定抗體能夠專一結合其抗原蛋白質的原理來對樣品進行著色,通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的資訊,來分析檢測特定蛋白質的生物學檢測技術。

發明者一般認為是美國斯坦福大學的喬治·斯塔克(ge***e stark)。在尼爾·伯奈特(neal bur***te)於2023年所著的《分析生物化學》(analytical biochemistry)中首次被稱為western blot。

western blot與southern或northern雜交方法類似,但western blot採用的是聚丙烯醯胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,「探針」是抗體,「顯色」用標記的二抗。經過page分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽型別及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。

該技術也廣泛應用於檢測蛋白水平的表達。

免疫組化的作用,免疫組化為什麼要用一抗又要用二抗啊

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