擬南芥中有沒有GUS基因,你好,想求一個GUS基因的引物序列?一般擴GUS時是擴全長還是其中一段序列?

2021-03-03 21:54:23 字數 1213 閱讀 6469

1樓:匿名使用者

絕對木有,

如果有的話,你怎麼還能轉gus基因然後觀察promoter的活性呢?!!

不同植物中gus基因序列一樣嗎

2樓:匿名使用者

可以肯定不會完全一樣,即使16s/18s等分子鐘基因也會有個別鹼基不同。

差異原因,有2個:

種屬等分類地位不同。

即使同種,不同個體仍有snp差異的。

套用一句名言:」世界上沒有2片完全相同樹葉「

gus基因和gusa基因的區別

3樓:匿名使用者

可以這樣做:根據目的序列設計引物,5' 引物、3' 引物加酶切位點,pcr產物連線pgem-t easy載體,構建目的基因克隆載體.pgem-t easy不知現在還有沒有賣的,有點貴,但成功率很高.

分別對pcambia 1301和pbi 121雙酶切,將pbi 121 gusa編碼序列連同camv35s啟動子和nos終止子片段反向插入pcambia 1301多克隆位點,構建帶有gus載體. 選適當的酶酶切自己構建的帶有gus的載體和目的基因cds,構建中間載體,將中間載體camv35s啟動子- 目的基因cds-nos終止子插入片段進行測序驗證,這個35s啟動子來自pbi 121,目的基因cds替換了來自pbi 121中的gusa編碼序列.至此,構建的雙元載體中共有3個camv35s啟動子,分別啟動pcambia 1301中gusa、hpt ii和插入的目的基因cds.

然後轉根癌農桿菌感受態細胞,擬南芥蘸花轉化,用潮黴素篩選,高的是轉化植株,gus染色確認,後續抗旱性驗證. 我想這個過程包含了你提到的幾個問題,酶的選擇根據目的基因序列,用軟體分析一下來確定.這是個真實的實驗,希望能提供參考.

同一個啟動子驅動gus在擬南芥中表達,為什麼有些植株gus表達強,有些卻弱

4樓:匿名使用者

因為t-dna的插入位點不一樣,基因表達的效果也就不一樣,通常把這些不同插入位點的植株稱為不同的株系。

你好,想求一個gus基因的引物序列?一般擴gus時是擴全長還是其中一段序列?

5樓:匿名使用者

引物序列

前: gtcgcgcaagactgtaacca後: cggcgaaattccatacctg產物大小1081bp,為gus基因的一段

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