酶聯免疫吸附試驗的效價是什麼意思

2021-03-04 09:21:24 字數 1255 閱讀 4934

1樓:南京金益柏生物科技****

elisa抗體效價

bai比是指抗體的物理狀態du

及其zhi在體內的滯留時間,dao以其與抗原反專應的多少來表示其免疫屬效果。

elisa中,只需將血清樣品先稀釋一定倍數後,在酶標板中逐孔倍比稀釋加樣,採用常規elisa方法檢測,讀取od值。高於空白對照od值2倍的孔判斷為陽性,顏色最淡的一孔陽性孔的稀釋倍數即為該血清樣品中目的抗體效價比。

抗體效價的檢測方法

2樓:愛你妹子°櫘檸

多采免疫雙向擴散法

【基本原理】

*指抗原和抗體在同一凝膠內都擴散,彼此相遇後形成特異性的沉澱線。

-將抗原與抗體分別加入同一凝膠板中兩個相隔一定間距的小孔內,使兩者進行相互擴散,當抗原抗體濃度之比相適宜時,彼此相遇形成一白色弧狀沉澱線。

*優缺點:簡便,但敏感性較低,易出現假陰性結果。

免疫雙向擴散法的操作步驟

*將玻璃板用水洗淨後用75%乙醇沖洗,晾乾後放在水平臺上備用。

*將1%agar 融化後,置56°C水浴。

*在玻璃板上鋪膠,約1.5mm 厚,凝固後打孔(直徑 3rnm),孔間距10mm。

l 抗血清(抗體預先作系列倍比稀釋即ml 抗原樣品,周圍孔內每孔加5m*中心孔加5 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。

*凝膠板置溼盒內,室溫擴散24h。

*觀察結果。

凝聚胺法測定孕婦血清igg抗-a(抗-b)效價的方法 待檢血清與0.2 mol/l 2?硫基乙醇(2?

me)在試管內等量混合,放入37°C水浴1 h以破壞血清中的igm抗體,吸取處理後的血清用生理鹽水倍比稀釋,稀釋度分別為2、4、8、16、32、64、128、256、512、1 024,然後每管加入相應的3%~5%紅細胞懸液,置37°C水浴30 min,觀察是否凝集,不凝集者用生理鹽水洗滌3次,然後加入低離子鹽水介質(lim液),混勻,滴入2滴凝聚胺,混勻後3 000 r/min離心30 s,扣搖肉眼可見明顯的凝集(無凝集者須重做),再加入2滴重懸液,輕搖,觀察凝集是否消失,凝集1 min內不消失者表示受檢者血清中含有igg型抗?a(抗?b)。

抗體效價檢測的其它方法

*環狀沉澱試驗,需較多的抗血清,現已很少用;

*對流免疫電泳,比瓊脂免疫雙擴散法敏感,較簡便、實用;

*酶聯免疫吸附試驗 (elisa)。

通常抗體效價低於1:128是沒有問題的,有些孕婦高達1:256以上,而且抗體效價最好1個月查上一次,有時候會有所變化。

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